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血小板檢測(cè)試劑盒(流式細(xì)胞儀法)

--指導(dǎo)血小板減少、輸血無(wú)效及免疫性血小板減少癥的精準(zhǔn)診療,即時(shí)評(píng)估止血與血栓風(fēng)險(xiǎn)

樣本類型:枸櫞酸鈉抗凝血

校準(zhǔn)品:請(qǐng)根據(jù)所用流式細(xì)胞儀型號(hào)選用廠家要求配套的校準(zhǔn)品

質(zhì)控品:請(qǐng)根據(jù)所用流式細(xì)胞儀型號(hào)選用廠家推薦的質(zhì)控品

配套儀器:中生BioCyte、FlowCyte/ZS-AE7S、FACSCantoII、FACSCalibur、DxFLEX、Navios、NovoCyte、BriCyte E6等流式細(xì)胞儀

 

指標(biāo)簡(jiǎn)介

血小板是骨髓巨核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)分割、脫落,并釋放到外周血中形成的。血小板在正常靜息狀態(tài)下,呈現(xiàn)雙凸蝶形,表面光滑,體積小(直徑約為2-4μm),沒(méi)有細(xì)胞核。血小板在各種誘導(dǎo)劑作用下釋放其顆粒內(nèi)容物,產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng),在初期止血過(guò)程中發(fā)生粘附-變形-釋放-聚集等反應(yīng),這些血小板的基本反應(yīng),統(tǒng)稱為血小板活化反應(yīng)?;罨“迮c靜息血小板相比,其質(zhì)膜糖蛋白常發(fā)生顯著的變化,這些變化的糖蛋白便成為活化血小板的檢測(cè)標(biāo)志物。血小板表面糖蛋白的檢測(cè)在血栓性疾病、血小板缺陷性疾病、血小板減少癥等疾病中有著重要的臨床意義。

 

檢測(cè)原理

流式細(xì)胞儀法:待測(cè)樣本的細(xì)胞懸液,在鞘液的包圍和約束下,細(xì)胞排成單列高速由流動(dòng)室噴嘴噴出,形成細(xì)胞液柱。當(dāng)液柱通過(guò)檢測(cè)區(qū),在入射的激光束照射下產(chǎn)生前向角散射光(FSC)和側(cè)向角散射光(SSC),它們分別反映細(xì)胞大小和顆粒度,根據(jù)這些特性可以將細(xì)胞分類。經(jīng)一種或幾種特殊熒光標(biāo)記的樣本,在激光束的激發(fā)下所產(chǎn)生的特定熒光,可被光學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)并輸送到計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析,得到細(xì)胞相應(yīng)的各種特性。

 

臨床應(yīng)用

(一)血小板計(jì)數(shù)

  • 血小板增多:(1)感染:感染是反應(yīng)性血小板增多的常見(jiàn)原因,可能因?yàn)榇傺“迳L(zhǎng)因子的釋放增加。(2)手術(shù)后:手術(shù)后可能因?yàn)樯眢w的炎癥反應(yīng)導(dǎo)致血小板增多。(3)惡性腫瘤:某些癌癥可能引起血小板增多,特別是能夠促進(jìn)血小板生成素釋放的腫瘤。(4)脾切除術(shù)后:脾切除后,由于失去了脾臟對(duì)血小板的清除作用,可能會(huì)導(dǎo)致血小板增多。(5)急性失血或鐵缺乏:急性失血后,身體可能會(huì)通過(guò)增加血小板的生成來(lái)應(yīng)對(duì),鐵缺乏也可能導(dǎo)致血小板增多。(6)創(chuàng)傷:嚴(yán)重創(chuàng)傷后,骨髓中的不成熟血小板可能進(jìn)入血液,導(dǎo)致血小板增多。(7)骨髓增殖性疾?。喝缯嫘约t細(xì)胞增多癥、骨髓纖維化早期、慢性粒細(xì)胞白血病等,這些疾病可能伴有血小板增多。(8)原發(fā)性血小板增多癥:這是一種骨髓增生性疾病,可能與促血小板生成素及其受體的改變有關(guān),部分患者有特定的基因突變。
  • 血小板減少:血小板生成減少的病因可分為遺傳性和獲得性。前者如Fanconi貧血、先天性伴畸形無(wú)巨核細(xì)胞血小板減少癥、May-Hegglin異常等;后者主要包含可對(duì)造血干細(xì)胞或骨髓造成損傷的因素,包括相關(guān)血液系統(tǒng)原發(fā)疾病、藥物、惡性腫瘤、感染、電離輻射等。多種疾病或治療相關(guān)因素可通過(guò)影響血小板生成、破壞、消耗和分布等因素導(dǎo)致血小板減少[1]

(二)網(wǎng)織血小板

  • 協(xié)助鑒別診斷原發(fā)性免疫性血小板減少癥(ITP):血小板減少性疾病在臨床上比較多見(jiàn),但在血小板減少的多種疾病中網(wǎng)織血小板的比例和絕對(duì)值均有相應(yīng)的變化。臨床上,網(wǎng)織血小板可作為協(xié)助原發(fā)性免疫性血小板減少癥(ITP)診斷的重要指標(biāo)。
  • 干細(xì)胞移植后血小板生成恢復(fù)的監(jiān)測(cè):網(wǎng)織血小板是造血干細(xì)胞移植中預(yù)測(cè)骨髓恢復(fù)的有用的指標(biāo),它在骨髓恢復(fù)時(shí)血小板計(jì)數(shù)增加前增加,而當(dāng)血小板計(jì)數(shù)開(kāi)始增加時(shí),網(wǎng)織血小板開(kāi)始下降。
  • 在透析患者中的應(yīng)用[2]:血液透析和腹膜透析患者的RP明顯高于正常對(duì)照組,而血小板總數(shù)無(wú)變化,提示血小板的更新加速的補(bǔ)充血小板的消耗。
  • 在肝病中的應(yīng)用[2]:肝硬化患者肝移植后血小板下降,是由于血小板消耗增加及血栓形成所致,移植后網(wǎng)織血小板含量增加,之后出現(xiàn)外周血血小板數(shù)量恢復(fù)。
  • 在膿毒癥中的臨床應(yīng)用:膿毒癥往往導(dǎo)致多器官功能障礙,骨髓是常見(jiàn)的受累器官,常表現(xiàn)為PLT降低。使用血小板計(jì)數(shù)、IPF%、IRF%、C反應(yīng)蛋白、APACHEⅡ來(lái)評(píng)估其對(duì)膿毒癥休克的診斷準(zhǔn)確性。
  • 在急性冠脈綜合癥中的臨床應(yīng)用:急性冠脈綜合征(ACS)是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂形成血栓的結(jié)果,心肌細(xì)胞受刺激后,血小板發(fā)生活化,促進(jìn)血栓形成。

(三)血小板無(wú)力癥

  • 與卵巢囊腫鑒別診斷,避免誤診:血小板無(wú)力癥女性多表現(xiàn)為月經(jīng)過(guò)多,少數(shù)青春期患者則表現(xiàn)為卵巢血腫,容易誤診為卵巢囊腫而導(dǎo)致手術(shù)。反復(fù)出血加劇原發(fā)疾病嚴(yán)重程度,從而導(dǎo)致圍手術(shù)期難以控制的腹腔內(nèi)出血。因此,對(duì)于合并血小板無(wú)力癥的青春期女性因卵巢囊腫就診,接診醫(yī)師應(yīng)仔細(xì)辨認(rèn)影像學(xué)結(jié)果,盡量避免手術(shù),減少誤診誤治[3]
  • 巨大血小板綜合征鑒別診斷:巨大血小板綜合征亦可以表現(xiàn)為出血時(shí)間延長(zhǎng),可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD42a(GPIX)和CD42b(GPⅠba)來(lái)和血小板無(wú)力癥相鑒別。

(四)血小板活化

  • 缺血性腦卒中類疾病:血小板活化在動(dòng)脈血栓的形成中起著關(guān)鍵作用。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)急性缺血性腦卒中患者血小板活化顯著增強(qiáng),且血小板活化狀態(tài)與缺血性腦卒中患者的嚴(yán)重狀態(tài)和疾病的進(jìn)展?fàn)顟B(tài)相關(guān),其梗死面積越大,血小板活化越明顯[6]
  • 冠心病[7]:冠心病的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,目前認(rèn)為在其發(fā)生、發(fā)展中,血小板活起著較為重要的作用。
  • 下肢深靜脈血栓(LDVT):目前已知體內(nèi)血栓形成的反應(yīng)起始于血小板的活化,活化后的血小板高度表達(dá)P-選擇素,通過(guò)各種機(jī)制始動(dòng)血栓形成過(guò)程中的凝血反應(yīng)。因此,P-選擇素可作為血小板活化的特異性標(biāo)志物[7]
  • 川崎病(Kawasaki disease,KD):KD患者血小板活化高于對(duì)照組,KD合并冠脈異常者高于未合并冠脈異常的KD患者,治療后,顯著降低。提示檢測(cè)血小板活化標(biāo)志物陽(yáng)性表達(dá)率能夠反映患兒血小板的活化程度,作為預(yù)測(cè)冠狀動(dòng)脈異常的高危指標(biāo)。
  • 糖尿病腎?。航暧醒芯堪l(fā)現(xiàn)糖尿病腎病患者血小板活化顯著高于不伴腎病者[8],且2型糖尿病早期患者開(kāi)始出現(xiàn)血小板活化,抗血小板活化藥物對(duì)2型糖尿病有一定的療效[9]

(五)巨大血小板綜合征

  • 巨大血小板綜合征診斷案例[4]:首都醫(yī)科大學(xué)附屬?gòu)?fù)興醫(yī)院血液科王立茹教授在巨大血小板綜合征案例分析中指出以下幾點(diǎn):①詳細(xì)詢問(wèn)病史足關(guān)鍵。對(duì)于該患者,正是其父母近親結(jié)婚和自幼出血傾向的病史將診斷的方向指向遺傳性出血惟疾病,這一點(diǎn)對(duì)低年資的住院醫(yī)師尤為重要。②診斷思路要開(kāi)闊。在疾病診斷過(guò)程中要考慮到常見(jiàn)病,也要考慮到一些少見(jiàn)病,尤其是常規(guī)治療療效不滿意時(shí)更要考慮可能引起相似臨床表現(xiàn)的少見(jiàn)病。③充分利用現(xiàn)有的各種診斷技術(shù),流式細(xì)胞檢測(cè)顯示血小板膜GPI b-Ⅸ-V復(fù)合物表達(dá)降低,是本例患者診斷BSS的最重要依據(jù)。
  • 與原發(fā)免疫性血小板減少癥(ITP)鑒別診斷[5]:溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院血液腫瘤科報(bào)道:一例患者自幼反復(fù)牙齦出血,骨髓檢查示巨核細(xì)胞增多伴成熟障礙,脾不腫大;予以止血、升血小板及激素治療后,血小板升高(低于正常范圍),當(dāng)時(shí)此患者診斷考慮"ITP"。但予激素治療十余年后未見(jiàn)好轉(zhuǎn),仍反復(fù)血小板減少伴出血,我科在回顧此病例的過(guò)程中考慮到誤診可能。綜合考慮診斷為"BSS",至蘇州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院做細(xì)胞流式術(shù)檢查證實(shí)"BSS"的診斷,患者目前于我院門(mén)診隨訪。

(六)白細(xì)胞-血小板凝集

  • PLAs與冠心病[10]:ACS(急性冠脈綜合征)組血小板-白細(xì)胞聚集體及血小板-單核細(xì)胞聚集體值均顯著高于SAP(穩(wěn)定型心絞痛)組和正常對(duì)照組,SAP(穩(wěn)定型心絞痛)組血小板-白細(xì)胞聚集體及血小板-單核細(xì)胞聚集體顯著高于正常對(duì)照組(P均<0.01),隨著病情的加重,有增高的趨勢(shì),有望作為冠心病預(yù)后的預(yù)測(cè)因子。
  • 血栓斑塊不穩(wěn)定性和血栓栓塞危險(xiǎn)性評(píng)估:PLAs的測(cè)定則可能作為患者體內(nèi)血栓斑塊不穩(wěn)定性的指標(biāo),并能提示臨床冠脈內(nèi)即將發(fā)生的血栓事件和炎癥反應(yīng)程度的動(dòng)力學(xué)信息。
  • 臨床抗凝治療療效評(píng)價(jià):血小板活化以及PLAs形成導(dǎo)致動(dòng)脈內(nèi)炎癥和血栓的加重,是臨床溶栓治療失敗,溶栓后血管內(nèi)再栓塞的重要原因,給予氯吡格雷后可減少PLAs形成[11]。因而對(duì)PLAs的檢測(cè)可以為我們提供有關(guān)患者對(duì)治療反應(yīng)性的信息。
  • PLAs與Ⅱ型糖尿病[12]:研究發(fā)現(xiàn),Ⅱ型糖尿病(T2DM)組的血小板與白細(xì)胞聚集與高血糖有明顯正相關(guān)性,且有微血管并發(fā)癥的糖尿病患者PLAs顯著高于無(wú)微血管并發(fā)癥的DM患者。

 

適用科室

檢測(cè)項(xiàng)目

適用科室

血小板計(jì)數(shù)

血液科、消化內(nèi)科、風(fēng)濕免疫科、呼吸內(nèi)科、腎臟內(nèi)科、心血管內(nèi)科、內(nèi)分泌科、感染科、腫瘤內(nèi)科、輸血科等

網(wǎng)織血小板

血液科:疑似原發(fā)性免疫性血小板減少癥(ITP)。干細(xì)胞移植后血小板生成恢復(fù)的監(jiān)測(cè)及血液腫瘤放、化療過(guò)程中,了解骨髓內(nèi)造血狀態(tài),指導(dǎo)臨床適時(shí)調(diào)整治療方案。
肝病科:肝移植
急診科:急性冠脈綜合征(ACS)的血栓風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)
內(nèi)科:溶血性貧血、腎性貧血等的初篩指標(biāo),可用于溶貧患者對(duì)鐵劑、紅細(xì)胞生成素等治療過(guò)程的監(jiān)測(cè)
透析科:血液透析和腹膜透析患者
ICU:膿毒癥休克的輔助診斷
輸血科:輸血病人的血小板檢測(cè)

血小板無(wú)力癥

婦科:與卵巢囊腫鑒別診斷,避免誤診
血液科:與其他血液疾病如巨大血小板綜合征鑒別診斷
輸血科:輸血病人的血小板檢測(cè)

巨大血小板綜合征

血液科:巨大血小板綜合征診斷;與其他血液疾病如原發(fā)免疫性血小板減少癥(ITP)鑒別診斷
輸血科:輸血病人的血小板檢測(cè)

血小板表面抗原

內(nèi)分泌科:糖尿病患者定期監(jiān)測(cè)血栓、糖尿病腎病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
心血管內(nèi)科:動(dòng)脈粥樣硬化、心梗、腦梗、高血壓、房顫病史
兒科:川崎病
門(mén)急診:危重癥患者血栓風(fēng)險(xiǎn)
體檢科:中老年人常規(guī)體檢,評(píng)估血栓風(fēng)險(xiǎn)
外科:手術(shù)后,監(jiān)測(cè)深靜脈血栓
婦產(chǎn)科:子癇前期定期監(jiān)測(cè)
腫瘤科:腫瘤轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)、部分腫瘤(如消化道腫瘤)的靜脈血栓風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
血液科:血小板無(wú)力癥、巨血小板綜合征
輸血科:輸血病人的血小板檢測(cè)

白細(xì)胞-血小板凝集檢測(cè)

內(nèi)分泌科:糖尿病患者定期監(jiān)測(cè)血栓、糖尿病腎病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
心血管內(nèi)科:動(dòng)脈粥樣硬化、心梗、腦梗
兒科:川崎病
門(mén)急診:危重癥患者血栓風(fēng)險(xiǎn)
體檢科:中老年人常規(guī)體檢,評(píng)估血栓風(fēng)險(xiǎn)
外科:手術(shù)后,監(jiān)測(cè)深靜脈血栓
婦產(chǎn)科:子癇前期定期監(jiān)測(cè)
腫瘤科:腫瘤轉(zhuǎn)移預(yù)測(cè)、部分腫瘤(如消化道腫瘤)的靜脈血栓風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估
輸血科:輸血病人的血小板檢測(cè)

 

參考文獻(xiàn)

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